背景说明:
对抗原性的研究导致了这样的概念,即干扰素等分子在同源系统中不具有免疫原性,因为通常不会产生针对“自身”抗原的抗体。然而,天然存在或治疗诱导的针对细胞因子如干扰素、肿瘤坏死因子 (TNF) 的抗体 ,发现了白细胞介素(IL)和各种生长因子,一般认为它们会抑制细胞因子的功能,因此此类抗体的出现应该会导致不同程度的细胞因子缺乏。 一个普遍的概念是,针对任何自身抗原或药物的抗体的开发总是不可取的。 这种抗体对自身免疫性疾病的病理学至关重要,并抑制包括外源性细胞因子在内的药物的药理作用。
检测原理:
将抗人干扰素α抗体包被在微孔板上。样品或标准品中存在的人干扰素α与吸附在微孔中的抗体结合。孵育后,在洗涤步骤中去除未结合的生物成分,并添加生物素缀合的抗人干扰素α抗体,并与第一抗体捕获的人干扰素α结合。温育后,未结合的生物素缀合的抗人干扰素α抗体在洗涤步骤中被去除。 添加链霉抗生物素蛋白HRP 并与生物素缀合的抗人干扰素α抗体结合。孵育后,在洗涤步骤中去除未结合的链霉亲和素 HRP,并将与 HRP反应的底物溶液添加到孔中。与样品或标准中存在的人干扰素α的量成比例地形成有色产物。通过添加酸终止反应并在 450 nm 处测量吸光度。从7种人干扰素α标准稀释液制备标准曲线并确定人干扰素α样品浓度。
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