【前言简介】
斑点发热组立克次体在世界范围内被发现并且通常由蜱叮咬进行传播。然而，蚤传立克次体（Rickettsia felis）是一种罕见的斑点性发热立克次体，由跳蚤传播，也在世界各地被发现。
斑疹伤寒组立克次体由感染的跳蚤和虱子传播。该组包括莫氏立克次体（地方性斑疹伤寒）和普氏立克次体（流行性斑疹伤寒），这两种物种均在世界范围内发现。随后的感染诱导特异性抗体应答，其可被检测并用作鉴定受感染人的间接手段。
【试剂盒组成成分】
底物玻片 10片
在每个孔中包含2个丙酮固定的抗原斑点的10×12孔载玻片。左边是莫氏立克次体，右边是蚤传立克次体。
IgG标记物
黄盖滴瓶，包含即用型亲和纯化和Alexafluor 488标记的山羊抗人IgG（重链），抗小鼠IgG、牛血清白蛋白和染色液。
IgG样品稀释液
缓冲液含有5％超声背景基质作为吸附剂。使用前通过倒置混合。
阳性质控
蓝盖滴瓶，含有对蚤传立克次体有反应性的血清，并以1:64的筛查稀释度进行装瓶，最大稀释滴度是1：512。
阳性质控
绿盖滴瓶，含有对莫氏立克次体有反应性的血清，并以1:64的筛查稀释度进行装瓶。最大稀释滴度是1：512。
阴性质控
红盖滴瓶，含有对立克次体无反应性的血清，并在1:64的筛查稀释下装瓶。
封固剂
白盖滴瓶，含50%甘油的PBS
洗涤液
将所提供的洗涤液加入到纯化水中，得最终PH7.2
【储存与处理】
试剂盒储存于2-8℃.使用前于先将试剂盒放置至室温（20-25℃）后,再打开瓶盖或封片.
【样本收集】
先将全血放置凝结后再离心分离血清。转移到一个无菌的密封容器,储存于2-8℃.如果血清样本保存时间超过5天,需置于-20℃或更低保存.急性期样本，立即采集；恢复期样本，需每隔2周或4周，采血一次，观察滴度变化。
【实验步骤】
1、 将阳性质控稀释至系列倍比浓度，包含其中一份高于最大稀释滴度，一份低于最大稀释滴度。注意：所有瓶装的质控品已预先按比例稀释.
2、将每个血清稀释液加入到一个载玻片孔中并记录该位置以供以后参考。对于每个测定，包括步骤1中制备的阳性对照和阳性对照的系列稀释。另外在一个孔中加入1滴阴性对照。应将样品应用于孔的顶部或底部边缘，避免在含有抗原微点的中间部分。
3、 将载玻片放入保湿盒中，37±0.5℃反应30分钟。
4、 从培养箱或水浴中取出湿度箱。还要取出取出复合物。用PBS慢慢冲洗载玻片孔，每次洗涤1排孔以避免混合样品。然后将载玻片浸入装有新鲜PBS的容器中至少5分钟。
5、 将载玻片在蒸馏水中短暂浸泡并使其风干。
6、 每孔加入1滴IgG结合物，放入保湿盒，37±0.5℃避光反应30分钟。
7、 加封固剂于各片中并盖上盖玻片.
8、 用荧光显微镜观察染色片.染色片在2-8℃下避光可保存24小时
