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PCR 芯片定义

  实时定量 PCR 是检测基因表达最灵敏,最可靠的方法。通过在试验过程中,实时监测荧光染料的信号变化,反映样品中的基因拷贝数。实时定量 PCR 线性范围广(能达到 5 个数量级),因此可以检测同一样品中表达量极低的基因和表达量很高的基因。但是,由于实时定量 PCR 需要制备标准曲线和同时分析内参基因,因此,每次实验只能检测少数几个基因的表达水平,若要检测大量基因,则工作量巨大,耗时长久。

  通过简单的,经过优化的实时定量 PCR 体系,如 SuperArray 的 RT 2 Profiler TM PCR 芯片,研究者可以同时研究大量基因,既可以进行某些特别感兴趣的信号通路的研究,也可以作为验证芯片结果的方法。

  为了获得理想的实验结果, PCR 芯片面临以下挑战:高特异性,高灵敏度和可重复性。高灵敏度或低检出限,在样品的总 RNA 量少,基因表达量低的情况下,也能检测出目的基因。高特异性,扩增产物严格保证基因特异性,避免非特异性产物,如引物二聚体的产生。可重复性,通过标准化的反应体系和实验方法,使得多人多次重复实验均能获得可靠的基因定量结果。

 

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