【前言简介】
催产素是一种神经垂体肽，在下丘脑的室旁核中产生并储存在垂体后叶中。该分子由9个氨基酸组成，它们连接着一个二硫键和一个半柔性羧酰胺尾。催产素是一种曾被认为仅限于女性平滑肌的生殖生理学激素，目前更多的研究结果已经确定催产素也可作为神经递质发挥作用，可能参与神经精神障碍，社会/性行为，并且在男性生殖生理学中很重要。催产素和相关的神经垂体肽Arg8-血管加压素维持肾水和钠平衡。
结构组成：H-Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2
催产素样神经垂体肽在物种边界高度保守，主要在残基4和/或8处被取代。在催产素样肽中，中催产素是在一些鱼类、爬行动物、两栖动物、有袋动物和非哺乳动物四足动物中发现的常见肽，亮氨酸在残基8处取代异亮氨酸。催产素以经典的内分泌方式发挥作用，通过结合特异性细胞表面受体引发调节作用，而细胞表面受体又通过磷酸肌醇信号传导途径启动二级细胞内级联反应。
【试剂盒组成成分】
1.微孔板：可拆96孔，包被羊抗兔IgG. 目录号80-0060
2.酶联物：5mL，目录号80-0249
与催产素结合的碱性磷酸酶, 蓝色溶液。
3.催产素抗体: 5 mL，目录号80-1494
一种兔抗催产素的多克隆抗体, 黄色溶液。
4.反应缓冲液: 27 mL，目录号80-1546
含有蛋白质和叠氮化钠作为防腐剂的缓冲液。
5. 浓缩洗涤液: 27 mL，目录号80-1286
含有洗涤剂的Tris缓冲盐水。
6.标准品：0.5mL，目录号80-0251
10,000 pg / mL催产素的溶液。
7.pNpp底物液: 20mL，目录号80-0075
对硝基苯磷酸盐在缓冲液中的溶液。即用型。
8.终止液: 5 mL，目录号80-0247
磷酸三钠的水溶液。保持盖子紧密。警告：腐蚀性。
9.板盖：1块，目录号30-0012
10.催产素测定布局表：1张，目录号30-0233
实验所需材料（未提供）：
1.去离子水或蒸馏水。
2.精密移液管，体积介于5μL和1,000μL之间。
4.用于稀释缓冲浓缩物的一次性烧杯。
5.带刻度的量筒
6.吸水纸。
7.可在405nm处读数的酶标仪（参考波长：570-590nm）
8.移液管：50和200µL。
【试剂保存】
酶联物和标准品外，该试剂盒的所有组分均在4°C下可保持稳定直至试剂盒的失效日期。 酶联物和标准品必须在-20°C下冷冻保存。
【步骤说明】
不要使用过期试剂，不要混用不同批号的试剂。
所有试剂在打开前应室温平衡至少30min。
标准品可在玻璃管或塑料管中制备。
用试剂预冲洗移液管尖端，每个样品，标准品和试剂使用新的移液管吸头
将标准品和样本加入到板孔的底部。
试剂加入到板孔边缘，以免污染。
板条是可拆卸的，可以根据需要多次使用，开封的板条必须封封保存在4°C。
必须注意尽量减少内源性碱性磷酸酶的污染
污染碱性磷酸酶活性，尤其是在底物溶液中，可能导致高空白OD。应注意不要用裸手触摸移液管尖端和测定中使用的其他物品。
在添加底物之前，确保孔中没有残留的洗涤缓冲液。剩余的洗涤缓冲液可能导致测定结果的变化。
【结果计算】
有几种方法可用于计算样品中催产素的浓度。我们建议使用免疫测定软件包处理数据，该软件包使用四参数逻辑曲线拟合程序（例如AssayBlaster™，目录号ADI-28-0002）。这种软件通常由酶标仪制造商提供。如果没有现成的数据缩减软件，催产素的浓度可以计算如下：
完整OD均值=结合OD均值-NSB OD均值
使用以下公式计算每对标准孔的结合作为最大结合孔（Bo）的百分比：
结合率=Ner OD/Net Bo OD ×100
绘绘制标准品的结合百分比与催产素浓度的百分比图，通过这些点，近似地画出一条直线。未知值中催产素的浓度可以通过该直线来确定。
