【前言简介】
北美的巴贝斯虫病是由巴贝斯原虫所引起的。它主要是通过受感染的壁虱叮咬进行传播并且人们一般认为，它可以与人粒细胞埃立克体（HGE）以及/或伯氏疏螺旋体协同传播。在以往的诊疗历史中，巴贝斯虫病的诊断是通过将外周血进行涂片处理，观察红细胞内含物的形态特征。本IFA检测试剂盒采用了被巴贝斯虫感染的仓鼠或者小鼠红细胞作为检测特异性抗体的抗原。
【检测原理】
将疑似巴贝斯原虫-立克次体感染的病人血清使用缓冲液稀释后加入到单独的孔中进行温育，使血清中的抗体与孔中抗原相结合。洗涤一次以洗去未反应的血清蛋白，然后加入荧光标记的抗人IgG抗体。再次洗涤洗去未结合的标记物。之后通过荧光显微镜进行观察。阳性结果可以观察到红细胞内边界清晰的苹果绿荧光显色的包含物。阳性结果随后继续检测以得出最高的滴度。
【检测方法】
1. 所有病人样本用PBS按一定比例进行预稀释。
2. 按需要稀释阳性质控。（注：所提供的阳性质控已经稀释过）。
3. 对应孔中加入稀释好的病人样品，阴性质控以及稀释好的阳性质控。
4. 将玻片放入湿盒中，37℃下温育30分钟。
5. 将玻片取出，使用洗涤剂洗涤3次，不要让孔中变干。
6. 每孔加入1滴荧光标记物，放回到湿盒中，37℃下避光温育30分钟。
7. 重复步骤5。
8. 玻片上滴加2-3滴封固剂，盖上盖玻片。
9. 使用荧光显微镜在400× 视野下，观察玻片。玻片可在2-8℃下避光保存24小时。
【巴贝斯原虫的检测结果说明】
1:64筛查滴度阳性：1:64或者更高滴度的阳性说明存在感染。当1:64阳性时，应进一步检测，以得出终点滴度，从而比较同一病人前后的抗体变化。
1:64滴度阴性： 不存在感染。
